Thứ sáu, 25/08/2017 00:16
Số 8 năm 201739 - 42Download

Chuyển gen ZmDEF1 nhờ Agrobacterium tumefaciens vào giống thuốc lá (Nicotiana tabacum L.) C9-1

Vì Thị Xuân Thủy1*, Bùi Thị Minh Thúy2, Hoàng Thị Huệ Khang2, Chu Hoàng Mậu2

*Tác giả liên hệ: Tel: 0983484171; Email: xuanthuy@utb.edu.vn

1Trường Đại học Tây Bắc
2Trường Đại học Sư phạm, Đại học Thái Nguyên 

Ngày nhận bài: 10/04/2017; ngày chuyển phản biện: 14/04/2017; ngày nhận phản biện: 26/05/2017; ngày chấp nhận đăng: 05/06/2017

Tóm tắt:

Defensin thực vật là protein đa chức năng, một trong các chức năng quan trọng là ức chế hoạt động của α-amylase từ ruột côn trùng. Dựa trên đặc tính này, nhiều tác giả đã nghiên cứu sử dụng defensin thực vật để bảo vệ cây trồng chống lại mọt hại hạt trong công nghệ bảo quản sau thu hoạch. Gen defensin1 (ZmDEF1) phân lập từ giống ngô địa phương Mai Sơn (Sơn La) - giống có khả năng kháng mọt ngô cao được sử dụng làm gen chuyển trong thí nghiệm tạo cây thuốc lá chuyển gen từ giống C9-1. Kết quả cho thấy, biến nạp cấu trúc pBetaPhaso-ZmDEF1 vào 60 mảnh lá của giống thuốc lá C9-1 trong 3 lần thí nghiệm thu được 56 mảnh sống sót, tạo được 69 chồi, chuyển được 12 cây chuyển gen ra trồng trong bầu đất và có 6 cây trồng tại nhà lưới sinh trưởng, phát triển bình thường, biểu hiện xanh tốt, mập mạp. Kiểm tra sự có mặt của gen chuyển ZmDEF1 ở các dòng thuốc lá chuyển gen bằng phản ứng PCR thu được 5/6 dòng cây chuyển gen chứa gen chuyển ZmDEF1, hiệu suất chuyển gen đạt 8,33%. Kết quả này là cơ sở để tiến hành thí nghiệm chuyển gen ZmDEF1 ở ngô nhằm tạo các dòng ngô chuyển gen có khả năng kháng mọt cao.

Từ khóa:

Chuyển gen, Defensin, kháng mọt, ức chế α-amylase, ZmDEF1. 

Chỉ số phân loại:
4.6

Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of ZmDEF1 into tobacco (Nicotiana tabacum L.) cultivar C9-1

Thi Xuan Thuy Vi1*, Thi Minh Thuy Bui2, Thi Hue Khang Hoang2, Hoang Mau Chu

1Tay Bac University
2Thai Nguyen University of Education
 

Received: 10 April 2017; accepted: 5 June 2017

Abstract:

Plant defensins are multifunctional proteins, and one of the important functions is the inhibition of α-amylase activity in insects. Based on this characteristic, many authors have studied and used plant defensins to protect crops against weevils in postharvest preservation. In this study, ZmDEF1 gene isolated from the local maize Mai Son (Son La) with a high resistance to maize weevils was used as a transgene in the experiment to create transgenic tobacco plants from the cultivar C91. Transferring the pBetaPhaso-ZmDEF1 into 60 leaf pieces of the C9-1 tobacco cultivar three times obtained 56 survival pieces, created 69 shoots, and 12 transgenic crops were transferred to nethouses, including 6 crops with normal growth and development, lush and stout expression. Testing the presence of the ZmDEF1 transgene in transgenic tobacco lines by PCR obtained 5/6 transgenic plants containing the ZmDEF1 transgene, and the transgenic efficiency reached 8.33%. This result is the basis for conducting transgenic experiments in maize plants to generate transgenic maize lines with high resistance to weevils. 

Keywords:

 Defensin, gene transfer, inhibit α-amylase, resistance to weevils, ZmDEF1 gene. 

Classification number:
4.6
Lượt dowload: 352 Lượt xem: 773

Đánh giá

X
(Di chuột vào ngôi sao để chọn điểm)