Chủ nhật, 25/02/2018 21:18
Số 2 năm 201836 - 42Download

Tạo phôi bò nhân bản không có zona pellucida

Nguyễn Khánh Vân, Quản Xuân Hữu, Vũ Thị Thu Hương, Nguyễn Thị Hương, Nguyễn Thị Lệ Hương, Phạm Doãn Lân

*Tác giả liên hệ: Email: pdlanvn@yahoo.com
 

Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ tế bào động vật, Viện Chăn nuôi 

Ngày nhận bài: 20/10/2017; ngày chuyển phản biện: 25/10/2017; ngày nhận phản biện: 27/11/2017; ngày chấp nhận đăng: 04/12/2017

Tóm tắt:

Mục tiêu của nghiên cứu này là tạo phôi bò nhân bản bằng phương pháp cấy chuyển nhân tế bào soma (nguyên bào sợi da tai bò) vào tế bào trứng bò không có zona pellucida. Phương pháp này bao gồm các bước: Loại nhân tế bào trứng bò thành thục không có zona pellucida bằng dao vi phẫu thuật hoặc micro pipette; dung hợp tế bào trứng nhận với tế bào cho (nguyên bào sợi da tai bò); nuôi in vitro trong hệ thống nuôi microwell. Kết quả nghiên cứu cho thấy, tỷ lệ tế bào trứng được loại nhân thành công đạt 84,89%, tỷ lệ tế bào trứng dung hợp thành công với tế bào cho đạt 86,91%. Sau khi dung hợp, các tế bào trứng đã dung hợp với tế bào cho được lựa chọn cho quá trình hoạt hóa và nuôi in vitro trong môi trường SOFaa. Tại thời điểm 18 giờ sau hoạt hóa, 88,89% tế bào trứng đã được tái cấu trúc ở giai đoạn 2 tiền nhân. Tỷ lệ phát triển phân chia và tạo phôi nang bò nhân bản tương ứng đạt 87,61 và 24,78%. Kết quả này cho thấy, các tác giả đã thực hiện thành công phương pháp tạo phôi bò nhân bản không có zona pellucida. Phương pháp tạo phôi bò nhân bản không có zona pellucida đơn giản, dễ sử dụng và hiệu quả.

Từ khóa:

Cấy chuyển nhân, microwell, phôi bò nhân bản không có zona pellucida. 

Chỉ số phân loại:
4.2

Production of zona-free cloned bovine embryos

Khanh Van Nguyen, Xuan Huu Quan, Thi Thu Huong Vu, Thi Huong Nguyen, Thi Le Huong Nguyen, Doan Lan Pham*

Key Laboratory of Animal Cell Biotechnology, National Institute of Animal Science 

Received: 20 October 2017; accepted: 4 December 2017

Abstract:

The objective of this work was to apply a new zona-free cloning method for producing cloned bovine embryos. The procedure of the method included enucleation of matured oocytes without zona pellucida using a microblade or micropipette; electrofusion of oocyte-donor cell pairs; in vitro culture in microwell system. By this method, the percentage of enucleated oocytes was 84.89%, and the percentage of fused oocytes with donor cells was 86.91%. After fusion, oocytes fused with donor cells were selected for activation and in vitro culture in SOFaa medium. At 18 hours after activation and culture, the rate of reconstructed oocytes was 88.89%. The development rates of cleavage and blastocyst embryos were 87.61 and 24.78%, respectively. In conclusion, the method of zona-free cloning of bovine embryos was conducted successfully in our lab. This method could be an easy, simple, fast, and efficient operation. 

Keywords:

 Microwell, nuclear transfer, zona-free cloned bovine embryos. 

Classification number:
4.2
Lượt dowload: 359 Lượt xem: 824

Đánh giá

X
(Di chuột vào ngôi sao để chọn điểm)