Thứ tư, 25/12/2019 00:36
Số 12 năm 201956 - 60Download

Xác định sự có mặt và phiên mã gen ZmLEA14A ở cây chuyển gen Nicotiana tabacum dòng NiC9-1

Hà Hồng Hạnh1, Bùi Mạnh Minh1, Lê Thị Thu Hiền1, 2, Huỳnh Thị Thu Huệ1, 2*

*Tác giả liên hệ: Email: hthue@igr.ac.vn

1Viện Nghiên cứu hệ gen, Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam
2Học viện KH&CN, Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam
 

Ngày nhận bài: 24/05/2019; ngày chuyển phản biện: 30/05/2019; ngày nhận phản biện: 03/07/2019; ngày chấp nhận đăng: 15/07/2019

Tóm tắt:

Chức năng của các protein LEA trong thực vật được quan tâm nhiều là chức năng bảo vệ thành tế bào trước các stress phi sinh học. Việc ứng dụng kỹ thuật di truyền để chuyển các gen LEA vào thực vật nhằm cải tiến tính chống chịu khô hạn đã được tiến hành nhiều năm nay. Đối với cây ngô, nhóm gen LEA được xác định gồm 9 nhóm phân bố đều trên 10 nhiễm sắc thể của ngô. Trong đó, gen ZmLEA14A được xác định nằm trong nhóm 5C chứa một khung đọc mở mã hóa cho một chuỗi polypeptide với 152 axit amin. Trong nghiên cứu này, gen ZmLEA14A phân lập từ cây ngô địa phương Tẻ vàng 1 đã được chuyển vào cây thuốc lá Nicotiana tabacum dòng NiC9-1, gen ZmLEA14A này nằm trong vector biểu hiện thực vật pCAM/35S-ZmLEA14A-35S dưới sự điều khiển của promoter cơ định 35S. Các cây thuốc lá chuyển gen được tạo ra phát triển tốt ở các giai đoạn khác nhau, với tỷ lệ sống trong phòng thí nghiệm là 89,2%. Khi sử dụng 7 cây chuyển gen để kiểm tra bằng phương pháp PCR cho thấy, gen ZmLEA14A đã được chuyển thành công vào hệ gen thuốc lá và trong đó 3 cây được kiểm tra thêm bằng RT-PCR cho thấy gen đã biểu hiện ở mức phiên mã. Như vậy, cấu trúc mang gen này đã có thể sử dụng để chuyển gen vào cây trồng đích khác nhằm tạo cây trồng mang gen ZmLEA14A được tăng cường khả năng chịu hạn.

Từ khóa:

chịu  hạn, chuyển gen, thuốc lá, ZmLEA14A

Chỉ số phân loại:
4.6

Verifying the presence and transcription of ZmLEA14A gene in Nicotiana tabacum line NiC9-1

Hong Hanh Ha1, Manh Minh Bui1, Thi Thu Hien Le1, 2, Thi Thu Hue Huynh1, 2*

*Tác giả liên hệ: Email: hthue@igr.ac.vn

1Institute of Genome Research, VAST
2Graduate University of Science and Technology, VAST

 

 

Received: 24 May 2019; accepted: 15 July 2019

Abstract:

The function of LEA proteins in plants that has received much attention recently is the cell wall protection against abiotic stresses. Improving the expression of  LEA genes to enhance plant drought tolerance has been carried out by various genetic engineering applications for many years. In maize, the LEA genes are evenly distributed over ten chromosomes and classified into nine major groups. Among these LEA genes, ZmLEA14A belongs to 5C group and encodes for an open reading frame (ORF) of a 152-amino-acid polypeptide chain. In the current study, the ZmLEA14A gene was isolated from Tevang1, a drought-tolerant maize landrace, and transferred into the NiC9-1 tobacco line. The expression of this transgene was driven under the control of a minimised 35S promoter. The transgenic tobacco plants developed normally at all different growth stages with a survival rate of 89.2% in the laboratory condition. The ZmLEA14A gene was successfully inserted into the tobacco genome, and the presence of the transgene was verified in 7 transgenic lines by PCR. Applying the RT-PCR technique in three transgenic lines showed that the ZmLEA14A gene was currently expressed at the transcription level. In conclusion, the structure harboring the ZmLEA14A gene could be used to transfer genes to other target crops to improve the drought tolerance.

Classification number:
4.6
Lượt dowload: 560 Lượt xem: 1421

Đánh giá

X
(Di chuột vào ngôi sao để chọn điểm)
Chấm điểm