Thứ sáu, 25/03/2016 00:26
Số 3 năm 201654 - 58Download

Kết quả nghiên cứu tạo cây khoai lang kháng bọ hà thông qua công nghệ gen

Phạm Bích Ngọc1*, Lê Trần Bình1 , Vũ Thị Lan1, 2, Chu Hoàng Hà1

*Tác giả liên hệ:pbngoc@ibt.ac.vn; Tel: 0912247887

1 Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam

2 Trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên

Ngày nhận bài: 22/07/2015; ngày chuyển phản biện: 25/07/2015; ngày nhận phản biện: 20/08/2015; ngày chấp nhận đăng: 24/08/2015

Tóm tắt:

Nghiên cứu này trình bày tóm tắt một số kết quả chính của đề tài cấp nhà nước về tạo cây khoai lang kháng bọ hà bằng công nghệ gen. Hai cấu trúc mang gen độc tố kháng bọ hà: cry3Ca1, vip2-1 đã được phân lập, tối ưu hóa mã di truyền, thiết kế vào cấu trúc điều khiển bởi promotor đặc hiệu đối với củ và biến nạp thành công vào giống khoai lang KB1 của Việt Nam theo quy trình tái sinh và chuyển gen nhờ vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. Kết quả đã chọn lọc và tái sinh được 401 dòng khoai lang chuyển gen bao gồm 246 dòng mang gen chuyển cry3Ca1 và 155 dòng mang gen chuyển vip2-1. Phân tích các dòng khoai lang chuyển gen đích bằng phương pháp sinh học phân tử đã thu được 27 dòng khoai lang chuyển gen cry3Ca1, 19 dòng khoai lang chuyển gen vip2-1 dương tính với phản ứng PCR; trong đó 7 dòng khoai lang chuyển gen cry3Ca1, 10 dòng khoai lang chuyển gen vip2-1 đã được phân tích bằng lai Southern. Đề tài cũng đã đánh giá được khả năng kháng bọ hà của một số dòng khoai lang chuyển gen ở điều kiện phòng thí nghiệm. Đồng thời, chứng minh được các dòng chuyển gen cry3Ca1, vip2-1 có khả năng bị thiệt hại bởi bọ hà thấp hơn rõ rệt (với mức độ phá hại PDI trung bình lần lượt là 1,75 và 2,1) so với các dòng đối chứng không chuyển gen (2,55). Kết quả này mở ra triển vọng cải thiện tính kháng bọ hà của cây khoai lang ở Việt Nam thông qua công nghệ gen.

Từ khóa:

Agrobacterium tumefaciens, chuyển gen, cry3Ca1, gen độc tố, khoai lang, Ipomoea batatas L., vip2-1. Chỉ số phân loại 4.6

Chỉ số phân loại:
4.6

RESULTS IN DEVELOPMENT OF WEEVIL RESISTANT SWEET POTATO LINES BY GENE T

Received: 22 July 2015; accepted: 24 August 2015

Abstract:

This paper presents the results in developtment of transgenic sweet potato (Ipomoea batatas L.) cv. KB1 resistant to sweet potato weevil (Cylas formicarius). The two vector constructions were transferred successfully into Vietnam’s sweet potato KB1 mediated by A. tumefaciens via multiple shoot inducting callus. Totally, the authors selected and regenerated 401 lines, including 246 putative transgenic lines carrying cry3Ca1 gene and 155 lines with vip2-1 gene in selection medium. The putative transgenic lines were proved positive by PCR and finalized by Southern hybridization: (1) Twenty seven transgenic lines of cry3Ca1 and 19 transgenic lines of vip2-1 gene were proved positive by PCR reaction; (2) Seven putative transgenic lines of cry3Ca1 and 10 putative transgenic lines of vip2-1 were proved successfully by Southern hybridization, confirming that the transgenic lines of KB1 cultivars contained a single or two copy of the transgene. Besides, the resistance to sweet potato weevil (C. formicarius) of transgenic sweet potato clones was also tested under controlled conditions. The transgenic lines of cry3Ca1 and vip2-1 were damaged by C. formicarius much lower than wild type. The results are expected to bring a prospect to improve the weevil resistance of sweet potatoes in Vietnam.

Keywords:

Agrobacterium tumefaciens, cry3Ca1 gene, insecticidal gene, ipomoea batatas L., sweet potatoes, transgenic, vip2-1 gene.

Classification number:
4.6
Lượt dowload: 373 Lượt xem: 743

Đánh giá

X
(Di chuột vào ngôi sao để chọn điểm)
Chấm điểm