Thứ hai, 25/02/2019 00:47
Số 2 năm 20198 - 12Download

Ứng dụng kỹ thuật Real-time PCR phát hiện mất đoạn AZF ở bệnh nhân vô sinh nam không có tinh trùng

Lương Thị Lan Anh* , Hoàng Thu Lan

* Tác giả liên hệ: Email: luongthilananh@hmu.edu.vn

Trường Đại học Y Hà Nội

Ngày nhận bài: 09/10/2018; ngày chuyển phản biện: 12/10/2018; ngày nhận phản biện: 15/11/2018; ngày chấp nhận đăng: 19/11/2018

Tóm tắt:

Nghiên cứu này ứng dụng kỹ thuật Real-time PCR phát hiện mất đoạn AZF ở 30 bệnh nhân nam vô sinh không có tinh trùng. 30 mẫu máu ngoại vi được chiết tách ADN, kỹ thuật Real-time PCR sử dụng 21 trình tự đích để phát hiện mất đoạn nhỏ thuộc vùng AZFabcd, bao gồm 6 cặp mồi vùng AZFa (sY84, sY86, sY82, sY1064, sY1065, sY88), 6 cặp mồi vùng AZFb/d (sY127, sY134, sY105, sY121, sY143, sY153), 7 cặp mồi vùng AZFc (sY254, sY255, sY1191, sY1192, sY1196, sY1291, sY160) và 2 nội kiểm ZFY/X, SRY. Kết quả phân tích có đối chứng với kỹ thuật multiplex PCR phát hiện 8 vị trí cơ bản (sY84, sY86, sY127, sY134, sY254, sY255, sY153, PB2) và điện di mao quản (xác định AZF mở rộng - 10 trình tự mở rộng): 4 cặp mồi vùng AZFa (sY82, sY83, sY88, sY1065), 3 cặp mồi vùng AZFb (sY105, sY121, sY1192), 3 cặp mồi vùng AZFc (sY1191, sY1291, sY160) và 2 nội kiểm ZFY/X, SRY. Kết quả nghiên cứu cho thấy, 40% (12/30) các trường hợp mất đoạn nhỏ trên nhiễm sắc thể (NST) Y ở các bệnh nhân nam không có tinh trùng. Mất đoạn vùng AZF cơ bản có 2/12 bệnh nhân (16,7%), mất đoạn vùng AZF mở rộng có 10/12 bệnh nhân (83,3%). Mất đoạn vùng cơ bản có kèm theo các vị trí mở rộng (sY1192, sY1191, sY1291, sY160). Tại các vị trí mở rộng, chủ yếu gặp các mất đoạn sY1291, sY1191 (AZFc) và sY1192 (AZFb).

Từ khóa:

AZF, Real-time PCR.

Chỉ số phân loại:
3.2

Application of Real-time PCR technique to detect AZF microdeletions in infertile men without sperm

Thi Lan Anh Luong* , Thu Lan Hoang

Hanoi Medical University

Received: 9 October 2018; accepted: 19 November 2018

Abstract:

Application of Real-time PCR technique to detect AZF microdeletions in 30 infertile men without sperm. Method: 30 peripheral blood samples were extracted with DNA, Real-time PCR technique using 21 target sequences to detect microdeletions of AZFabcd, including 6 primer pairs of AZFa (sY84, sY86, sY82, sY1064, sY1065, sY88), 6 primer pairs of AZFb/d (sY127, sY134, sY105, sY121, sY143, sY153), 7 primer pairs of AZFc (sY254, sY255, sY1191, sY1192, sY1196, sY1291, sY160), and two internal STSs ZFY/X, SRY. The results of the control analysis by the multiplex PCR technique revealed 8 basic STSs (sY84, sY86, sY127, sY134, sY254, sY255, sY153, PB2), and the capillary electrophoresis with AZF expansion (10 extended STSs) exhibited 4 primer pairs of AZFa (sY82, sY83, sY88, sY1065), 3 primer pairs of AZFb (sY105, sY121, sY1192), 3 primer pairs of AZFc (sY1191, sY1291, sY160), and two internal STSs ZFY/X and SRY. These techniques were used for diagnosis. Results and conclusions: there were 40% (12/30) of patients with microdeletions in the AZF, basic microdeletions and extention microdeletions were 16.7% and 83.3%, respectively. In extention locations, the major microdeletions were sY1291, sY1191 (AZFc) and sY1192 (AZ Fb).

Keywords:

AZF, Real-time PCR.

Classification number:
3.2
Lượt dowload: 498 Lượt xem: 2119

Đánh giá

X
(Di chuột vào ngôi sao để chọn điểm)
Chấm điểm