Thứ ba, 25/06/2019 00:58
Số 6 năm 201966 - 69Download

Phát hiện vi khuẩn bằng đĩa giấy lọc hấp phụ luciferase và luciferin

Nguyễn Thị Dung*

∗ Email: dung.nguyenthi.tunhien@gmail.com.

Trường Đại học Công nghệ, Đại học Quốc gia Hà Nội

Ngày nhận bài: 15/10/2018; ngày chuyển phản biện: 19/10/2018; ngày nhận phản biện: 26/11/2018; ngày chấp nhận đăng: 18/12/2018

Tóm tắt:

Sự có mặt của các loại vi khuẩn trong môi trường không khí, đất và nước là một trong những nguyên nhân chính gây ra các bệnh về đường hô hấp và các bệnh ngoài da cho con người và các loại vật nuôi. Do đó, việc phát hiện sớm các vi khuẩn quanh môi trường sống là yếu tố then chốt để ngăn chặn mối nguy hại phát sinh từ vi khuẩn. Trong nghiên cứu này, tác giả thiết kế và xây dựng một giấy lọc nhỏ có đường kính khoảng 0,5 cm được hấp phụ thêm luciferin và enzym luciferase. Giấy lọc này có khả năng định lượng được lượng vi khuẩn trong mẫu thông qua việc định lượng hàm lượng ATP có trong vi khuẩn. Quy trình chế tạo giấy lọc hấp phụ luciferase và luciferin đã được tối ưu hóa. Giấy lọc hấp phụ luciferase và luciferin cho thấy khả năng giữ ổn định luciferase và luciferin trong 30 ngày ở điều kiện nhiệt độ phòng, và khả năng phát hiện nồng độ E. coli có thể lên tới 1,17x103 CFU/ml. Phương pháp phát hiện vi khuẩn qua việc định lượng hàm lượng ATP bằng giấy lọc hấp phụ luciferase và luciferin có thể giảm thời gian phát hiện vi khuẩn xuống còn 5 phút. Phương pháp xác định hàm lượng vi khuẩn bằng giấy lọc hấp phụ enzym luciferase và cơ chất luciferin là một phương pháp mới, triển vọng cao trong việc phát triển các cảm biến hóa sinh có độ chính xác cao và cho kết quả nhanh.

Từ khóa:

ATP, cảm biến điện hóa, giấy lọc, luciferase, luciferin, vi khuẩn.

Chỉ số phân loại:
2.7

Detection of bacteria by adsorption of luciferase and luciferin in paper discs

Thi Dung Nguyen*

University of Engineering and Technology, Hanoi VNU

Received: 15 October 2018; accepted: 18 December 2018

Abstract:

There are numerous microbes in the air, soil, and water, which is one of the main cause of some respiratory diseases and external ailments in human and livestock. Therefore, the early detection and identification of microorganisms is a key factor to prevent the risks associated with microbial infections. In this study, paper discs (0.5 cm in diameter) was prepared with the adsorption of luciferase and luciferin and used to determine the adenosine triphosphate (ATP) in bacteria. The repetition of sequential adsorption/drying of the reaction solution (luciferase and luciferin) on the paper discs was optimised. The storage stability of the paper discs was about one month at room temperature after the preparation. The paper discs adsorped with luciferase/luciferin could detect the ATP extracted from Escherichia coli (E. coli) as low as 1.17x103 CFU/ml. ATP evaluation using the paper discs for detection of bacteria may reduce the detection time to less than 5 min. The novel paper discs immobilized with luciferase and luciferin are valuable for the development of fast and sensitive sensors for early detection of microorganisms

Keywords:

ATP, bacteria detection, biosensor, luciferase, luciferin, paper disc.

Classification number:
2.7
Lượt dowload: 462 Lượt xem: 1298

Đánh giá

X
(Di chuột vào ngôi sao để chọn điểm)